原生质体转化不成功原因

1、 酶解 30 min-1 h 镜检原生质体活率低。首先要检查酶解液的 PH 是否低于 5.5，酶解液 PH 较低会影响原生质体状态其次检查酶解过程中是否进行了避光措施，不采取避光措施会对原生质体质膜造成伤害从而导致活性降低。

2、 酶解时间超过某一时间后活率出现下降，这种情况是因为酶解时间过长导致的原生质体活率下降。

原生质体得率低最大可能是酶解液未能很好的接触切口，比如水稻叶片组织，本身不易浸入酶解液中，可以通过真空泵辅助的方法使酶解液进入组织内部，从而提高原生质体得率还有可能是原生质体没能很好的从切口处游离出去，可以使用更高转速的摇床来辅助原生质体释放，或者通过对酶解后组织的轻微挤压来帮助原生质体释放。