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pcr内标没起来是什么原因

pcr内标没起来是什么原因

有可能是抑制物及核酸提取中试剂的混入

内源性内标,常采用的是样本中固有的人体细胞中的管家基因,如RNase P等人源基因,这些基因在人体各器官组织细胞中普遍存在,存在于采集的咽拭子等标本中,因此可以检测是否采集到了上皮细胞及整个实验操作过程的准确性,由于人基因组和病毒提取效率存在一定差别,内源性内标无法完全监测提取过程中存在的问题。

外源性内标,常用的是MS2噬菌体等假病毒,在临床标本制备前加入,然后与标本中的靶核酸一起经历核酸提取过程,可以较全面地监测从核酸提取到产物分析全过程的有效性。外源性内标不但可以监测标本中PCR抑制物及核酸提取中试剂的混入所致的假阴性外,而且还可以监测因为PCR扩增仪孔位间温度的不准确及核酸的提取效率太低所致的假阴性。

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