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載體構造和選擇的條件

載體構造和選擇的條件

載體主要有病毒和非病毒兩大類,其中質粒 DNA 是一種新的非病毒轉基因載體。

載體選擇主要考慮下述3點:【1】構建 DNA 重組體的目的,克隆擴增/基因表達,選擇合適的克隆載體/表達載體。【2】.載體的類型:(1)克隆載體的克隆能力-據克隆片段大小(大選大,小選小)。如<10kb 選質粒。(2)表達載體據受體細胞類型-原核/真核/穿梭,哺乳類細胞表達載體。(3)對原核表達載體應該注意:選擇合適的啓動子及相應的受體菌,用於表達真核蛋白質時注意克服4個困難和閱讀框錯位表達天然蛋白質或融合蛋白作爲相應載體的參考。【3】載體 MCS 中的酶切位點數與組成方向因載體不同而異,適應目的基因與載體易於鏈接,不能產生閱讀框架錯位。

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