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gilbert法測序基本原理,maxam

maxam-gilbert法測序基本原理

maxam-gilbert的化學斷裂法是DNA序列分析最常用的方法之一,它既適用於雙鏈DNA,也適用於單鏈DNA。

它的基本原理是利用幾個具有鹼基專一性的化學切斷反應將單個末端被32P標記的DNA分子進行部分切斷,產生幾組從標記末端到與鹼基專一性反應相應的那種鹼基在DNA中每個位點的長短不同的片段,這幾組片段在凝膠電泳中並排着按鏈長被分開,對凝膠進行放射自顯影后就可以得到代表每個鹼基位置的帶譜,從這個帶譜可以直接讀出從標記末端向另一個末端方向的鹼基序列。