凱氏定氮法觀察到的主要現象

根據凱氏定氮原理測定需要三個步驟，即消化、蒸餾、滴定。

消化：將含氮的有機化合物（蛋白質）與濃硫酸和催化劑（硫酸銅或凱氏消化片）一同加熱，使蛋白質分解，其中碳和氫被氧化成二氧化碳和水逸出，而樣品中的有機氮轉化為氨（NH3)並與硫酸結合形成硫酸銨。(銨 NH4+）

消化過程：微火加熱煮沸，燒瓶內物質炭化變黑，產生大量泡沫，泡沫消失後加大火力保持微沸狀態，至液體成藍綠色澄清狀態後繼續加熱 05-1h，結束後冷卻。（可使用自動消解儀完成前處理工作）

蒸餾：得到的溶液經稀釋定容後加入NaOH，蒸餾釋放出NH3，冷凝之後收集於硼酸溶液中。

蒸餾過程：先將消化好的樣品進行稀釋，加入NaOH，經過加熱後產生的氨氣進入冷凝管，經過冷凝之後流入裝有硼酸溶液的接收瓶中。形成硼酸銨。（硼酸溶液中加有混合指示劑，形成硼酸銨之後吸收液由酸性變為鹼性，顏色由紫紅轉變為藍綠色。）

滴定：用已知濃度的鹽酸標準溶液進行滴定，根據鹽酸消耗的量來計算出氮的含量，然後乘以相應的換算因子，即得到蛋白質的含量。（滴定是指一種定量分析的手段，也是一種化學實驗操作。它通過兩種溶液的定量反應來確定某種溶質的含量，是根據指示劑的顏色變化指示滴定終點，然後目測標準溶液消耗體積，計算分析結果。）

滴定過程：用鹽酸標準溶液滴入硼酸銨溶液中，使溶液的顏色由藍綠色變為淺紅色。

對有機物進行硝化測氮，液體(沸石)先炭化，温度升高濃硫酸冒白煙，繼續硝化溶液顏色變淺漫漫轉化為綠色。

蒸餾瓶中過量的氫氧化鈉使銅離子轉化為褐色的沉澱，硼酸吸收液由紅色變為藍綠色。