熒光轉基因實驗原理

其原理簡述如下：

（1）構建一個將靶啓動子的特定片段插入到熒光素酶表達序列前方的報告基因質粒，如pGL3-basic等。

（2） 將要檢測的轉錄因子表達質粒與報告基因質粒共轉染293細胞或其它相關的細胞系。如果此轉錄因子能夠激活靶啓動子，則熒光素酶基因就會表達，熒光素酶的表達量與轉錄因子的作用強度成正比。

（3） 加入特定的熒光素酶底物，熒光素酶與底物反應，產生熒光，透過檢測熒光的強度可以測定熒光素酶的活性，從而判斷轉錄因子是否能與此靶啓動子片段有作用。