20mmpbs缓冲液如何配制
试剂: NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O
配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1)0.2mol/L的 Na2HPO4称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L的 Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)
pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5、7 93.5 6.5
5、8 92.0 8.0
5、9 90.0 10.0
6、0 87.7 12.3
6、1 85.0 15.0
6、2 81.5 18.5
6、3 77.5 22.5
6、4 73.5 26.5
6、5 68.5 31.5
6、6 62.5 37.5
6、7 56.5 43.5
6、8 51.0 49.0
6、9 45.0 55.0
7、0 39.0 61.0
7、1 33.0 67.0
7、2 28.0 72.0
7、3 23.0 67.0
7、4 19.0 81.0
7、5 16.0 84.0
7、6 13.0 87.0
7、7 10.5 89.5
7、8 8.5 91.5
7、9 7.0 93.0
8、0 5.3 94.7